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0574-88350052
型號 | GP-3000 |
脈沖形式 | 指數(shù)衰減和方波 |
高壓輸出電壓 | 401-3000V |
低壓輸出電壓 | 50-400V |
高壓電容 | 10-60μF,以1μF步進(推薦10μF、25μF、35μF、50μF、60μF) |
低壓電容 | 25-1575μF,以1μF步進(推薦以25μF步進) |
并接電阻 | 100Ω-1650Ω,以1Ω步進(推薦以50Ω步進) |
電源電壓 | 100-240VAC50/60HZ |
連續(xù)放電個數(shù) | 1-9 |
放電及間隔時間 | 0.1ms-999ms,增量0.1ms |
控制方式 | 微電腦控制 |
時間常數(shù) | 帶RC時間常數(shù),可調(diào)節(jié) |
主機外形尺寸 | 30*20*20cm |
主機凈重 | 4.5kg |
包裝尺寸 | 58*36*25cm |
產(chǎn)品說明
GP-3000基因?qū)雰x由儀器主機、基因?qū)氡皩S眠B接線等組成。主要是利用電轉(zhuǎn)化來將DNA轉(zhuǎn)入感受態(tài)細胞、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比,基因?qū)雰x法具有高重復性,高效率、操作簡易、可定量控制等優(yōu)點,同時,電轉(zhuǎn)沒有基因毒性,已經(jīng)成為不可缺少的分子生物學基本技術(shù)。
工作原理
細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細胞電穿孔 (electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導入細胞膜內(nèi)部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。
由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
細胞電轉(zhuǎn)電場圖 1 細胞膜近似絕緣體,細胞附近電轉(zhuǎn)液中電流扭曲。 2 在串聯(lián)電路中電阻越大分到電壓越大,細胞兩端電壓基本都落在兩端細胞膜上。 3 只有一個細胞端面電轉(zhuǎn)有效。 4 細胞質(zhì)內(nèi)分到電壓很小,DNA電轉(zhuǎn)進入細胞膜后馬上停止,后續(xù)靠細胞本身機制慢速擴散。 5 細胞核兩端電壓及其微小,微小的電壓又落在核膜上,核內(nèi)部完全沒有電壓,電轉(zhuǎn)沒有基因毒性。 |
應用領(lǐng)域
? 細菌、酵母及其他微生物的電轉(zhuǎn)化 | ? 導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結(jié)構(gòu)和功能進行研究 | ? 細胞雜交、融合基因?qū)?/span> |
? 導入標記基因起到標記、指示的作用 | ? 哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)染、植物組織和原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)染 |
產(chǎn)品特點
? 效率高 轉(zhuǎn)化時間短、轉(zhuǎn)化率高、重復性優(yōu)異 | ? 智能儲存:可存儲實驗參數(shù),方便用戶調(diào)取 |
? 控制精準 采用微處理器控制的脈沖放電 | ? 外形美觀 整機一體化設(shè)計,顯示直觀,操作簡單 |
實驗舉例
1、LI J等人基于高通量篩選分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制劑的研究結(jié)果。[1] | 2、ZHANG S Y等人發(fā)現(xiàn)和鑒定一個獨特的G蛋白偶聯(lián)受體119激動劑的研究結(jié)果。[2] | |
1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌種的轉(zhuǎn)化率
備注:因各單位實驗條件不盡相同,以上實驗參數(shù)僅供參考
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